RESUMEN:

El déficit de factor V (FV) es una enfermedad hereditaria ultra rara, de transmisión recesiva, causada por mutaciones en el gen F5 que conducen a una deficiencia o disfunción del FV de la coagulación. Su manifestación clínica es muy variable, desde pacientes asintomáticos hasta episodios hemorrágicos graves, y el tratamiento actual se limita al uso de plasma fresco congelado, con un efecto transitorio y sin capacidad preventiva a largo plazo. La ausencia de modelos animales viables ha supuesto hasta ahora una limitación importante para el estudio de la enfermedad y el desarrollo de nuevas terapias.

El objetivo de este trabajo ha sido desarrollar una estrategia de terapia génica basada en vectores lentivirales para el tratamiento del déficit de FV, así como generar un modelo animal viable que permitiera su evaluación. Para ello, se caracterizaron y normalizaron previamente los parámetros coagulométricos en ratón. Posteriormente, mediante la tecnología CRISPR/Cas9, se generó un modelo murino portador de la mutación Thr1857Met, equivalente a una mutación humana asociada a un fenotipo leve, obteniéndose animales homocigotos viables con niveles reducidos de FV y alteraciones compatibles con la vida.

Una vez validado el modelo, se diseñó un transgén terapéutico capaz de expresar un FV funcional sin el dominio B. Los ensayos realizados demostraron una mejora significativa de la funcionalidad del FV tanto in vitro como in vivo, con aumento de la actividad coagulante y normalización parcial de los tiempos de coagulación en los animales tratados. Estudios tisulares confirmaron la integración hepática del vector y la expresión estable de la proteína terapéutica.

Los resultados obtenidos demuestran la viabilidad del modelo en ratón y la eficacia preliminar de la terapia génica propuesta. Además, esta estrategia podría aplicarse a otras coagulopatías hereditarias, ampliando las opciones terapéuticas en enfermedades raras. Esta investigación contribuye al avance de la medicina personalizada, posicionando la terapia génica lentiviral como una alternativa duradera frente a los tratamientos convencionales y con el potencial de mejorar significativamente la calidad de vida de los pacientes afectados.